Controlling proteolytic degradation of the methionine enriched MB-1Trp protein

Protein design is currently used for the creation of new proteins with desirable traits, which include a superior nutritional value. One of the challenges of protein design in this area is to achieve the production of stable native-like proteins that resist the proteolytic pressure of the organism used for its production (the bioreactor). We report here the identification of a specific peptide bond sensitive to E. coli proteolysis in the designer protein MB-1Trp. In an attempt to reduce proteolysis, we have created a MB-1TrpHis gene library in which the two amino acids surrounding the peptide bond, N44 and L45, were randomized using degenerated oligonucleotides. The initial characterization of MB-1TrpHis N44E/L45V and MB-1TrpHis N44E/L45M, 2 variants of the library that were more resistant than the parent protein, was performed in order to investigate the nature of the mutants' resistance. Our results suggest that the mutants behaved like MB-1Trp regarding folding and thermal stability, and that proteolytic resistance is due to the elimination of the protease recognition site.

Acidúria glutárica tipo 1: variabilidade fenotípica. Estudo de seis pacientes / Glutaric aciduria type 1: phenotypic variability. Report of 6 patients

Estudamos seis pacientes com acidúria glutárica tipo I, em quatro famílias. Observamos variaçoes intensas na apresentaçao clínica, mesmo entre elementos da mesma família. Três pacientes evoluiram sem alteraçoes até o início das anomalias neurológicas, que se manifestaram como encefalite-símile, no primeiro ano de vida. Uma criança apresentou atraso precoce do desenvolvimento, sem episódios agudos de descompensaçao. Dois pacientes nao têm alteraçao cognitiva; um deles apresenta leve tremor associado a quadro coreoatetóide desde o primeiro ano de vida, enquanto o outro teve apenas duas crises convulsivas afebris quando lactente. Três crianças apresentam distonia como sequela, nao sendo capazes de sentar ou firmar a cabeça. Os seis pacientes apresentam macrocrania e a neles tomografia computadorizada de crânio demonstra aumento dos espaços liquóricos em regioes fronto-temporais. O estudo dos ácidos orgânicos urinários dos pacientes demonstra elevaçao dos níveis do ácido glutárico.

Nueva alternativa para el cálculo de recomendaciones de ingesta de proteína en humanos: necesidades de proteína de una población adulta con dietas a base de arroz y frijol / New alternative to estimate the recomendations of protein intake in humans: protein requirements of an adult population fed with a diet based on rice and bean

En esta comunicación se propone un nuevo método para estimar las necesidades de proteína de una población, y se presentan las recomendaciones de ingesta proteínica para adultos alimentados con dieta a base de arroz e frijol. Con este propósito, se tomaron datos de estudios de índice de balance de nitrógeno corto, notificados previamente, de 40 sujetos adultos que habían participado en 160 períodos de balance de nitrógeno en los que consumieron dietas a base de arroz y frijol, suplementadas o no con proteína animal y/o energía. El método propuesto se basa en la respuesta curvilínea entre la ingesta de nitrógeno y el balance de éste. Para ello se calcula la ecuación de segundo grado que describe la relación entre el balance de nitrógeno y la ingesta. Utilizando el concepto matemático de primera y segunda derivada, se obtiene el punto de inflexión de la curva, el cual se interpreta como aquella condición en la que el individuo utiliza el nitrógeno dietético con máxima eficacia; la ingesta de nitrógeno correspondiente a ese punto se toma, pues, como la recomendación dietética de nitrógeno para el individuo. Al comparar los datos obtenidos valiéndose de la ecuación cuadrática, con los valores obtenidos por el método tradicional de ecuaciones lineales, se constataron valores estadísticamente iguales (P < 0.05) en ambos sistemas. La recomendación de ingesta proteínica de una población adulta alimentada con una dieta a base de arroz y trijol resultó ser de 0.80 y 0.77 g/kg/día, por el método de la ecuación curvilínea y el método convencional, respectivamente. Al complementar la dieta con 10% de proteína de leche y con un mismo nivel de energía, los valores encontrados fueron de 0.64 y 0.71 g proteína/kg/día para ambos métodos en ese orden. Además, se calculó la ingesta y absorción de aminoácidos esenciales a partir de las dietas de arroz y frijoles a los niveles recomendados por ambos métodos para ser en balance de nitrógeno. Se encontró que en todos los casos los individuos satisfacieron los requerimientos de todos y cada uno de los aminoácidos esenciales señalados por FAO/OMS, siendo la isoleucina y los aminoácidos azufrados, los que aparentemente limitan este tipo de dieta

Evaluación del cómputo aminoacídica corregido por digestibilidad para estimar la calidad proteínica y la proteína utilizable de alimentos y dietas / Evaluation of the adjusted aminoacid score by digestibility to estimate the protein quality and the protein available in foods and diets

El trabajo aquí descrito tuvo como propósito evaluar el método del cómputo aminoacído corregido por digestibilidad para estimar la calidad proteínica y la proteína utilizable de alimentos y dietas, tomando como referencia el método biológico de la utilización proteínica neta (NPU). Se relacionaron 10 alimentos de origem vegetal, 10 de origen animal y ocho mezclas de éstos. Al considerar todos los alimentos, se obtuvo una correlación positiva (r = 0.83) y altamente significativa (P <0.001) entre la NPU y el cómputo amiaminoacído corregido por la digestibilidad. Al separar los alimentos según su origen, la correlación fue positiva (r = 0.93) y significativa (P <0.001) sólo en los vegetales. A su vez sólo en los alimentos vegetales se encontró concordancia entre los valores de NPU y cómputo amiaminoacído corregido por digestibilidad, así como en la proteína utilizable estimada considerando la NPU y el cómputo amiaminoacído corregido por digestibilidad. Se sugiere interpretar con cautela los valores de calidad y proteína utilizable de alimentos de origen animal y mezclas de vegetal y animal, cuando se utiliza en forma indistinta el método del cómputo amiaminoacído corregido por digestibilidad, o la NPU